Изучение влияния экзогенного NO на рост микроорганизмов in vitro

В работе были использованы клинические штаммы E.coli, St. aureus, Ps.aeruginosa, P.vulgaris, Candida albicans, являющихся наиболее типичными возбудителями госпитальной инфекции. Суспензированные в физиологическом растворе суточные культуры микроорганизмов в концентрации до 10⁶ КОЕ/мл по 1 стандартной петле (0,005мл) высевали на плотную питательную среду – среда Плоскирева, желточно-солевой агар с маннитом, кровяной агар, среда Эндо. Высеянные культуры обрабатывали NO-СГП аппарата «ПЛАЗОН» в течение 1, 3 и 5 мин с расстояния 6 см круговыми маятникообразными движениями. Обработанные чашки инкубировали в аэротермостатах при 37°С в течение 24 часов, после чего оценивали рост микроорганизмов. В контрольных исследованиях высевы культур в той же дозе ничем не обрабатывали.
Для проверки предположения о возможности влияния NO на факторы агрессии микроорганизмов, которые часто детерминированы плазмидами, использовали клинический гемолитический штамм E.coli Hly⁺. После обработки в течение 1мин исследовали гемолитическую активность штамма непосредственно облученной культуры и после её подращивания в течение 20 часов в питательном бульоне. Для получения достоверных результатов проведены три аналогичные серии опытов.
В результате проведенного эксперимента были получены следующие данные. При экспозиции в 1 минуту получен рост E.coli, St. aureus, Ps. aeruginosa и Pr. vulgaris, существенного разрежения посева по сравнению с контролем не было. Однако при экспозиции 3 и 5 минут рост микрофлоры отсутствовал. Для уточнения минимальной бактерицидной экспозиции были использованы более короткие интервалы обработки – от 1 до 3 минут. Было установлено, что при экспозиции 1 мин 15 сек отмечается разрежение посевов, значительно возросшее после обработки длительностью 1 мин 20 сек, при обработке в 1 мин 30 сек роста уже не получено. При изучении дрожжеподобных грибов рода Candida их жизнеспособность сохранялась при всех экспозициях без видимого разрежения.
При изучении гемолитической активности штамма E.coli Hly⁺ (непосредственно облученной культуры и после её подращивания в течение 20 часов в питательном бульоне) элиминации плазмид не наблюдалось.
Таким образом, можно утверждать, что клетки бактерий, относящиеся к различным видам, погибают под действием экзогенного оксида азота при экспозиции 1минута 30секунд. Снижение численности популяции микроорганизмов произошло более чем на три порядка.

Версия для печати